医学微生物学实验安排

第一次实验

1、介绍微生物学实验目的、要求、实验室规则

2、显微镜使用（油镜）

3、细菌的基本形态观察：球菌 （葡萄球菌,链球菌）、杆菌（大肠杆菌）、弧菌（霍乱弧菌）

4、肠道菌的分离与鉴定1：肠道菌SS平板划线分离

5、细菌染色法1：革兰氏染色（葡萄球菌、大肠杆菌）

6、正常人体皮肤上的细菌分布

7、空气中细菌的检测

8、录象：细菌感染的检查方法和防治原则

第二次实验

1、细菌形态观察：梅毒螺旋体、钩端螺旋体

2、细菌的特殊结构观察：荚膜（肺炎球菌）、鞭毛（伤寒杆菌）、芽胞（破伤风梭菌）

3、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌在血琼脂平板上的培养特征

4、葡萄球菌血浆凝固酶试验

5、肥达试验

6、肠道菌的分离与鉴定2：双糖培养基接种及初步鉴定

7、细菌染色方法2：奈瑟氏染色（白喉棒状杆菌）

第三次实验

1、细菌形态观察：肉毒杆菌 (革兰氏染色)、产气荚膜杆菌（荚膜染色）、淋球菌(革兰氏染色)

2、肠道菌的分离与鉴定3 半固体培养基、五糖管的接种

生化反应（糖发酵、IMViC、硫化氢、尿素酶）

3、物理消毒与灭菌：紫外线对细菌的作用

4、细菌对抗生素敏感性试验

5、细菌染色方法3：抗酸染色

6、记录肠道菌分离与鉴定的过程，并分析试验结果

第四次实验

1、真菌形态染色 白色念珠菌(革兰氏染色)、 新型隐球菌（墨汁染色）

2、真菌的培养 大培养(酵母型、类酵母型、丝状菌落) 、小培养（小分生孢子、大分生孢子）

3、病毒的形态学 细胞病变（单纯疱疹病毒）

包涵体 (狂犬病毒内基小体)

4、鸡胚接种

5、病毒血清学试验 血凝试验 （流感病毒）

血凝抑制试验 （流感病毒）

6、录像

第五次实验

1、聚合酶链反应（PCR）

2、提问复习

3、 实验考试

人体寄生虫实验

实验一 人体寄生虫学总论、似蚓蛔线虫

（一）CAI课件教学

1．人体寄生虫学总论

2．似蚓蛔线虫（人蛔虫）

（二）示教标本

1．人体寄生虫学总论

（1）人体寄生虫学的三个组成部分

医学原虫：疟原虫、阴道毛滴虫；

医学蠕虫：吸虫—血吸虫、姜片虫；绦虫—猪肉绦虫；线虫—钩虫、蛔虫；

医学昆虫：蚊、蜱。

（2）生物与生物间的关系

共栖：鮣鱼背鳍演化成吸盘，吸附在大型鱼类体表。

寄生：a、钩虫幼虫寄生于犬小肠；

b、血吸虫寄生于兔肠系膜静脉；

c、肺吸虫成虫寄生于犬肺；

d、疟原虫寄生于人红细胞；

e、旋毛虫寄生于鼠横纹肌。

（3）寄生虫的适应性变化：血吸虫、姜片虫、钩虫；

（4）寄生虫对人体的危害

a、血吸虫病肝硬化； b、蛔虫性肠梗阻； c、猪囊虫病（脑）。

2．似蚓蛔线虫（人蛔虫）

（1）蛔虫的自然形态；

（2）蛔虫寄生在肠管中；

（3）受精蛔虫卵、未受精蛔虫卵，脱蛋白质膜蛔虫卵。

（三）自看标本

受精蛔虫卵、脱蛋白质膜受精蛔虫卵、未受精蛔虫卵。

实验二 十二指肠钩口线虫、美州板口线虫、毛首鞭形线虫、

蠕形住肠线虫、旋毛形线虫

（一）CAI课件教学

（二）示教标本

1．钩虫、鞭虫、蛲虫虫卵及成虫自然形态

2．两种钩虫口囊和交合伞

3．犬钩虫咬附在肠壁

4．鞭虫附着肠壁的大体标本

5．肌组织内旋毛虫囊包染色标本

（三）自看标本：钩虫卵、鞭虫卵和蟯虫卵。

（四）示范操作

　　　1. 钩蚴试管培养法

2．钩虫卵计数法

3．透明胶纸法

4．小鼠骨骼肌压片检查旋毛虫幼虫

（五）实验操作

（一）直接涂片法

（二）饱和盐水漂浮法

实验三 班氏吴策线虫、马来布鲁线虫、华支睾吸虫、布氏姜片吸虫、

卫氏并殖吸虫、斯氏狸殖吸虫

（一）CAI课件教学

（二）示教标本

1．两种丝虫成虫和微丝蚴

2、肝吸虫、姜片虫、肺吸虫的虫卵、成虫、中间宿主

3．肝吸虫成虫寄生于肝胆管内

4．姜片虫成虫寄生于肠道

5．斯氏狸殖吸虫的自然形态

6．卫氏并殖吸虫寄生于犬肺

（三）自看标本

1．班氏微丝蚴与马来微丝蚴染色标本；

2．肝吸虫、姜片虫、肺吸虫虫卵。

（四）示范操作

1．厚血膜片制作：

2．肺吸虫酶联免疫吸附试验：斑点金免疫渗滤法（DIGFA）

（五）设计性实验：肝吸虫囊蚴的鉴别。

实验四 日本血吸虫、链状带绦虫、 肥胖带绦虫、曼氏迭宫绦虫

（一）CAI课件教学

（二）示教标本

1．血吸虫、绦虫虫卵、成虫自然形态

2．尾蚴染色标本、活尾蚴、钉螺

3．日本血吸虫成虫寄生于肠系膜静脉

4．日本血吸虫病兔的肝脏

5．间接血凝实验的结果观察；

6．带绦虫囊尾蚴

7．猪囊尾蚴寄生在人脑内

8．受感染的猪肉（米猪肉）标本；

9．曼氏迭宫绦虫的头节

10．裂头蚴寄生于蛙体内

（三）自看标本：

1．日本血吸虫虫卵；

2．日本血吸虫成虫染色玻片标本。

（四）示范操作

1．阳性钉螺的检查—尾蚴逸出法

2．日本血吸虫病原学检查—沉淀孵化法

（五）实验操作

1．阳性钉螺检查—压碎法

2．科研性实验

学生科技小组活动，肠道寄生蠕虫卵自我检查。

（1）用饱和盐水漂浮法和直接涂片法检查肠道可能寄生的蠕虫卵；

（2）记录检查结果，撰写检查报告。

实验五 溶组织内阿米巴、结肠内阿米巴、阴道毛滴虫、

兰氏贾第鞭毛虫、刚地弓形虫

（一）CAI课件教学

（二）示教标本

1．溶组织内阿米巴、结肠内阿米巴包囊和滋养体

2．阴道毛滴虫滋养体；

3．兰氏贾第鞭毛虫包囊和滋养体

4．弓形虫假包囊

（三）自看标本

溶组织内阿米巴滋养体和包囊染色片；

（四）示范操作

溶组织内阿米巴包囊碘液染色法

实验六 间日疟原虫、恶性疟原虫、医学节肢动物

（一）CAI课件教学

（二）示教标本

1．间日疟原虫及恶性疟原虫红内期

2．按蚊胃壁上的卵囊

3．三属蚊蚊卵、蛹、成蚊

4．四种蝇的形态、蝇足

5．蚤、印鼠客蚤、人虱、耻阴虱自然形态

6．硬蜱、疥螨成虫

7．毛囊蠕形螨、皮脂蠕形螨

（三）自看标本

1．间日疟原虫薄血片

2．恶性疟原虫薄血片

3．三属成蚊针插标本

4．四种重要蝇种：舍蝇、绿蝇、金蝇、麻蝇

5．硬蜱玻片标本

（四）示范操作

疟原虫薄血片的制作（瑞氏染色法）

（五）实验操作：

科研性实验——大学生蠕形螨流行病学调查

1．挤压法

2．透明胶纸法

六、实验测验： 医学原虫部分。